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RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

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線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽(yáng)離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見(jiàn)細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點(diǎn):優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)染測(cè)試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過(guò)95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。哪家有GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng),PEI轉(zhuǎn)染試劑

對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。.PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品,每批產(chǎn)品出廠前都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的檢測(cè),保證每批產(chǎn)品都100%合格、穩(wěn)定且品質(zhì)高,但由于作為轉(zhuǎn)染試劑使用過(guò)程中有很多實(shí)驗(yàn)室因素(配置方法,PH,水純度,稱(chēng)量的準(zhǔn)度,dnaRNA純度,細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞品系…)造成溶解出現(xiàn)問(wèn)題或者轉(zhuǎn)染效率出現(xiàn)差異,所以廠家只受理該產(chǎn)品純度,分子量及重量缺失破損等相關(guān)投訴,針對(duì)極個(gè)別客戶(hù)溶解問(wèn)題和轉(zhuǎn)染效率問(wèn)題我們能友善解決。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!浙江高性?xún)r(jià)比PEI轉(zhuǎn)染試劑哪里有賣(mài)GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑?

RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng),PEI轉(zhuǎn)染試劑

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請(qǐng)自行確定適合檢測(cè)時(shí)間。

線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽(yáng)離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見(jiàn)細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點(diǎn):優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)染測(cè)試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過(guò)95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!用PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí)出現(xiàn)沉淀是什么原因?

RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng),PEI轉(zhuǎn)染試劑

注意事項(xiàng)質(zhì)粒質(zhì)量:請(qǐng)務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級(jí)無(wú)內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過(guò)260nm光吸收測(cè)定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi))。如有可能,請(qǐng)通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)粒的完整性。細(xì)胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒(méi)有被細(xì)菌、或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞。PEI轉(zhuǎn)染試劑對(duì)復(fù)合物孵化的時(shí)間是有要求的,一般建議5~20分鐘之間。國(guó)產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑好用么

如何辨別假的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:

1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。

2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶(hù)自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。

3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。

歡迎咨詢(xún)PEI產(chǎn)品!RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司位于自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)達(dá)爾文路16幢104室,擁有一支專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)。專(zhuān)業(yè)的團(tuán)隊(duì)大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗(yàn),熟悉行業(yè)專(zhuān)業(yè)知識(shí)技能,致力于發(fā)展PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote的品牌。公司不僅*提供專(zhuān)業(yè)的生物醫(yī)藥科技(人體干細(xì)胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開(kāi)發(fā)和應(yīng)用除外)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、自有技術(shù)轉(zhuǎn)讓?zhuān)⑻峁┫嚓P(guān)的技術(shù)咨詢(xún)和技術(shù)服務(wù);計(jì)算機(jī)軟件的開(kāi)發(fā)、設(shè)計(jì)、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷(xiāo)售自產(chǎn)產(chǎn)品;實(shí)驗(yàn)室試劑及耗材(藥品、危險(xiǎn)品除外)、化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品)、儀器儀表、機(jī)械設(shè)備、電子設(shè)備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進(jìn)出口、傭金代理(拍賣(mài)除外)?!疽婪毥?jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】,同時(shí)還建立了完善的售后服務(wù)體系,為客戶(hù)提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。誠(chéng)實(shí)、守信是對(duì)企業(yè)的經(jīng)營(yíng)要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造的血小板裂解液,WB自動(dòng)孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍(lán)牙無(wú)線標(biāo)簽機(jī)。

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遼寧美標(biāo)球閥報(bào)價(jià)

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硬密 等 56 人贊同該回答

硬密封球閥是一種高性能的閥門(mén),被廣泛應(yīng)用于石油、化工、天然氣、制藥、水處理等各個(gè)領(lǐng)域。硬密封球閥的特點(diǎn)1.高密度聚四氟乙烯PTFE)密封,密封性能好,閥門(mén)的漏率可以達(dá)到零。2.閥門(mén)的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,體積小、 。

廣西優(yōu)良全球集運(yùn)物流費(fèi)用
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第1樓
全球 等 98 人贊同該回答

全球集運(yùn)物流的流程通常包括以下步驟:1.客戶(hù)下單:客戶(hù)通過(guò)線上或線下渠道向物流公司下單,提供貨物信息、目的地、運(yùn)輸方式等信息。2.貨物接收:物流公司接收客戶(hù)的貨物,并進(jìn)行檢查、稱(chēng)重、包裝等操作。3.運(yùn) 。

寧波專(zhuān)業(yè)活動(dòng)倉(cāng)儲(chǔ)棚定制
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第2樓
活動(dòng) 等 41 人贊同該回答

活動(dòng)倉(cāng)儲(chǔ)棚也被較多應(yīng)用于許多行業(yè),例如農(nóng)業(yè)、倉(cāng)儲(chǔ)、物流、建筑等。在建造工地、倉(cāng)儲(chǔ)物資時(shí),活動(dòng)倉(cāng)儲(chǔ)棚也能夠解決倉(cāng)儲(chǔ)物品的暫時(shí)存儲(chǔ)問(wèn)題??傊?,活動(dòng)倉(cāng)儲(chǔ)棚在其靈活性、易操作性、抗風(fēng)防雨能力等方面都具有很大的 。

棗莊超長(zhǎng)商用洗手池
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第3樓
就是 等 23 人贊同該回答

就是水槽柜的注意事項(xiàng)。大家都知道廚房潮的部分其實(shí)是這里,所以在我們水槽柜這個(gè)位置,一定要采用防水的實(shí)木多層,防水鋁箔板加上鋁錫箔的設(shè)計(jì)。生活中可能很多人都會(huì)遇到這樣的問(wèn)題,雖然廚房里安裝了水槽和水前列 。

河南多功能防干燒智能定時(shí)器品牌排行榜
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第4樓
從南 等 72 人贊同該回答

從南京飛往昆明的MU9608航班,因?yàn)橐晃慌康拇中拇笠?,進(jìn)行了一次“空地”緊急聯(lián)動(dòng),完成了驚心動(dòng)魄的“關(guān)火”任務(wù)。事情是這樣的,一位搭載此次航班的張女士,在飛機(jī)起飛后約50分鐘,突然想起自己家的燃?xì)?。

無(wú)錫汽車(chē)零件料架制造商
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第5樓
隨著 等 76 人贊同該回答

隨著環(huán)保意識(shí)的不斷提高,汽車(chē)零部件周轉(zhuǎn)料架將更加注重綠色環(huán)保設(shè)計(jì),采用環(huán)保材料制造的汽車(chē)零部件周轉(zhuǎn)料架將對(duì)環(huán)境影響更小,同時(shí)還將注重回收再利用,降低廢棄物料的產(chǎn)生。為了滿足現(xiàn)代化工業(yè)生產(chǎn)的高要求,汽車(chē) 。

徑向纏繞機(jī)優(yōu)勢(shì)
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第6樓
包裝 等 25 人贊同該回答

包裝機(jī)械已成為我國(guó)機(jī)械工業(yè)中重要行業(yè)之一。纏繞包裝機(jī)種類(lèi)很多,但工作模式都是一樣的,使用纏繞膜來(lái)裹包貨物。機(jī)器在使用過(guò)程中難免會(huì)出現(xiàn)故障,那么纏繞機(jī)常見(jiàn)的故障有哪些,應(yīng)該怎樣解決呢?下面星裹智能設(shè)備就 。

江陰客廳辦公室綠化服務(wù)
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第7樓
花卉 等 72 人贊同該回答

花卉分為哪幾類(lèi)我國(guó)素有“世界園林之母”的美稱(chēng),花卉資源豐富,種類(lèi)繁多,為便于栽培、管理和利用,需要了解花卉的分類(lèi)知識(shí)。由于分類(lèi)的依據(jù)不同。因而分類(lèi)的方法變亦各不相同。根據(jù)花卉的形態(tài)特征,通常將花卉分為 。

浙江房地產(chǎn)消防設(shè)備電源監(jiān)控系統(tǒng)
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第8樓
大數(shù) 等 53 人贊同該回答

大數(shù)據(jù)與消防設(shè)備電源系統(tǒng)的關(guān)系主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:數(shù)據(jù)采集和存儲(chǔ):消防設(shè)備電源系統(tǒng)中的傳感器可以采集大量的數(shù)據(jù),如電流、電壓、溫度等參數(shù)。這些數(shù)據(jù)可以被存儲(chǔ)在云端或本地?cái)?shù)據(jù)中心中,以便后續(xù)分析和處 。

廣西電子調(diào)壓器哪家好
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第9樓
單相 等 36 人贊同該回答

單相電力調(diào)整器是運(yùn)用數(shù)字電路觸發(fā)可控硅實(shí)現(xiàn)調(diào)壓和調(diào)功。調(diào)壓采用移相控制方式,調(diào)功有定周期調(diào)功和變周期調(diào)功兩種方式。該控制板帶鎖相環(huán)同步電路、上電緩起動(dòng)、緩關(guān)斷、散熱器超溫檢測(cè)、電流限制、過(guò)流保護(hù)。單相 。

海門(mén)工具柜
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第10樓
可以 等 39 人贊同該回答

可以說(shuō)超市每一個(gè)空間都是有利潤(rùn)的, 而超市必然也是需要使用到合適的儲(chǔ)物柜,而且智能儲(chǔ)物柜也是很多超市好的選擇,這樣操作簡(jiǎn)單,同樣也可以保證后續(xù)的維護(hù)工作變得更加容易。不過(guò)這類(lèi)儲(chǔ)物柜都是需要進(jìn)行定制,因 。

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